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細胞簡介：

兔表皮黑色素分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層，由胚胎時期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構，由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質層。黑色素細胞是皮膚產生和維持色素的主要細胞，起源于神經嵴，后逐漸遷移到表皮和毛囊。黑色素細胞的異?；蚬δ艿氖Се铝艘幌盗须y治性色素性疾病的發生，如、黃褐斑等。表皮黑色素細胞主要分布于位于表皮的基底層，與表皮細胞共同組成表皮黑素單位，其主要功能是產生黑素小體保護皮膚免受損害。

方法簡介：

實驗室分離的兔表皮黑色素先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的兔表皮黑色素經S-100免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：梭形、多角形

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔表皮黑色素體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產品：

兔子補體蛋白4(C4)ELISA 試劑盒

Human vascular endothelial cell growth factor receptor 1 (VEGFR-1) ELISA Kit 人血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)檢測試劑盒

Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit 人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanEsadiolreceptor,ER檢測試劑盒人雌二醇受體(ER)檢測試劑盒規格：96T/48T

組織SGK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

HumanOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAKit人骨鈣素/骨谷蛋白(OT/BGP)檢測試劑盒規格：96T/48T

DPP4重組食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 蛋白 Protein

IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原 0.5mgIL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原

SCGN重組人 SCGN / Secretagogin 蛋白 Protein

IL23R Protein Human 重組人 IL23R / IL23 Receptor 蛋白 (Fc 標簽)

S100A5 Protein Mouse 重組小鼠 S100A5 蛋白

IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原 0.5mgIL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原

IL23R Protein Human 重組人 IL23R / IL23 Receptor 蛋白 (Fc 標簽)

DPP4重組食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 蛋白 Protein

S100A5 Protein Mouse 重組小鼠 S100A5 蛋白

SCGN重組人 SCGN / Secretagogin 蛋白 Protein

豚鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)檢測試劑盒 ，英文名： SCF/MGF ELISA Kit

Human para aminobenzoic acid (PABA) ELISA Kit 人對(PABA)檢測試劑盒

RabbitCollagenaseIELISAKit 兔子膠原酶I(CollagenaseI)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforb-FABP(Humanbrainfattyacidbindingprotein)ELISAKit人腦型脂肪酸結合蛋白

細菌糖酵解MRVP檢測試劑盒20次

RabbitIerferonα,IFN-αELISAKit兔子α干擾素(IFN-α)檢測試劑盒規格：96T/48T

兔表皮黑色素細胞人轉移因子(TF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人結腸癌抗原(CCA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

中文名稱   方法   規格

人H-rasELISAKit   ELISA.   96T/48T

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。