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產(chǎn)品名稱:豬等孢球蟲通用LAMP試劑盒

產(chǎn)品特點(diǎn):豬等孢球蟲通用LAMP試劑盒上海一研生物相關(guān)產(chǎn)品:聚二甲硅烷擔(dān)載的鈀/氧鋁混合催英稱:Mixed catalysis of palladium / alumina supported by poly two methyl silane分子式:分子量::P2280

丙硫氧嘧分子式:170.23英稱:Propylthiouracil:51-52-5分子量: C7H10N2OS

產(chǎn)品型號:50次

更新日期:2021-02-20

訪問次數(shù):351

50次豬等孢球蟲通用LAMP試劑盒的詳細(xì)資料:

儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

參數(shù)規(guī)格:

產(chǎn)品名稱

豬等孢球蟲通用LAMP試劑盒

英文名稱

 Universal lamp kit for Isospora suis

規(guī)格

50次

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使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

2-羥并噻唑分子式:151.19英文名稱:2羥并噻唑:934-34-9分子量: C7H5NOS

鹽酸鄰菲羅啉分子式:234.68英文名稱:Hydrochloric acid hydrochloride:3829-86-5分子量: C12H8N2·HCl·H2O

腈唑分子式:336.82英文名稱:Benzene, benzene:114369-43-6分子量: C19H17ClN4

5,6-雙(正辛氧代)-2,1,3-并噻唑分子式:393英文名稱:5,6- (double octyl oxo) -2,1,3- benzothiazole:1254353-37-1分子量: C22H36N2O2S

聚二甲硅烷擔(dān)載的鈀/氧鋁混合催英文名稱:Mixed catalysis of palladium / alumina supported by poly two methyl silane分子式:分子量::P2280

丙硫氧嘧分子式:170.23英文名稱:Propylthiouracil:51-52-5分子量: C7H10N2OS

亮綠SF淡黃英文名稱:Light green SF分子式:792.85分子量: C37H34N2O9S3Na2:5141-20-8

對甲分子式:218.03英文名稱:Iodine toluene:624-31-7分子量: C7H7I

二甲氯鋁分子式:92.5英文名稱:Two methyl chloride:1184-58-3分子量: C2H6AlCl

豬等孢球蟲通用LAMP試劑盒 C11ORF45 基因全長ORF克隆

CD64 基因全長ORF克隆

重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 標(biāo)簽)

EphB3 / HEK2 (aa 585-998) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

FGFBP3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 PTMA 基因全長ORF克隆

大鼠 CAV1 基因全長ORF克隆

重組人 IL20 / Interleukin-20 蛋白

小鼠 IFNAR1 / IFNAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

SPIB 基因全長ORF克隆

重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

GRB2 基因全長ORF克隆

 

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