- 大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞;RM1九月開學(xué)季優(yōu)惠活動(dòng)
- 小鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)elisa試劑盒?“八月中旬優(yōu)惠盛宴”
- 如何使用熒光定量RT-PCR試劑盒進(jìn)行實(shí)驗(yàn)
- 血紅素加氧酶ELIS檢測試劑盒?特惠活動(dòng)
- 羅氏熒光定量試劑盒的儲(chǔ)存條件與操作注意事項(xiàng)
- 豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)elisa試劑盒?的夏季優(yōu)惠活動(dòng)
- 卡他莫拉菌LAMP試劑盒新品上架七月優(yōu)惠
- 大鼠微纖絲相關(guān)糖蛋白3(MFAP3)elisa試劑盒優(yōu)惠
- 接觸蛋白相關(guān)蛋白樣4ELISA檢測試劑盒優(yōu)惠
- 評(píng)估IRF1 ELISA定量試劑盒性能的方法
產(chǎn)品名稱:大腸彎曲桿菌LAMP試劑盒
產(chǎn)品特點(diǎn):大腸彎曲桿菌LAMP試劑盒上海一研生物相關(guān)產(chǎn)品:50ml親和層析柱 (2.5×16) 50ml 個(gè)Racanisodamine 17659-49-3 20mgL-Leucine L--白氨酸 61-90-5 200mg
產(chǎn)品型號(hào):50次
更新日期:2021-02-01
訪問次數(shù):306
50次大腸彎曲桿菌LAMP試劑盒的詳細(xì)資料:
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 | 大腸彎曲桿菌LAMP試劑盒 |
英文名稱 | Campylobacter coli lamp Kit |
規(guī)格 | 50次 |
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
?
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
Phenyl -Sepharose 6FF 苯基-瓊脂糖凝膠 6FF 25mL 瓶
50ml親和層析柱 (2.5×16) 50ml 個(gè)
Racanisodamine 17659-49-3 20mg
L-Leucine L--白氨酸 61-90-5 200mg
CTAB 溴代十六烷基三 100g 瓶
0.5ml/1.5ml雙面離心管架 60孔 個(gè)
6-Benzyl Aminopurine 6-芐氨基喋呤 1g 瓶
兩性電解質(zhì)pH4-6 40% 12ml 瓶
Thioflavin T 硫黃素T 5g 瓶
蓋玻片 24×50mm 100片 盒
Epoxy activated Sepharose 6B環(huán)氧活化-瓊脂糖凝膠6B 5g 瓶
超濾離心管 4ml-3KD 4ml 個(gè)
大腸彎曲桿菌LAMP試劑盒大鼠 ITFG1 基因全長ORF克隆
大鼠 RPS18 基因全長ORF克隆
大鼠 AHSG 基因全長ORF克隆
人 NSUN5 基因全長ORF克隆
人 CD106 / VCAM1 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 EDNRB / Endothelin B Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
人 DCK 基因全長ORF克隆
重組人 / 恒河猴 / 狗 TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白
人 PPIL3 基因全長ORF克隆
人 NR0B2 基因全長ORF克隆
如果你對(duì)50次大腸彎曲桿菌LAMP試劑盒感興趣,想了解更詳細(xì)的產(chǎn)品信息,填寫下表直接與廠家聯(lián)系: |