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如何正確使用GSH 酶聯(lián)免疫分析試劑盒?
點擊次數(shù):384 更新時間:2020-02-25
如何正確使用GSH 酶聯(lián)免疫分析試劑盒?
GSH 酶聯(lián)免疫分析試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)的含量。
操作步驟:
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
24μg/L 5號標準品 150μl 的原倍標準品加入 150μ1 標準品稀釋液
12μg/L 4號標準品 150μl 的5號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
6μg/L 3號標準品 150μl 的4號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
3μg/L 2號標準品 150μl 的3號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
1.5μg/L 1號標準品 150μl 的2號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μ1,空白孔除外。GSH 酶聯(lián)免疫分析試劑盒
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。GSH 酶聯(lián)免疫分析試劑盒
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