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鼠抗人肥大細胞類單克隆抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
SW626(人卵巢癌細胞)
T-24(人膀胱癌細胞)
T-47D(人乳腺管癌細胞)
T84(人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細胞)
Tca-8113(人舌鱗癌細胞)
TE-1(人食管癌細胞)
TF-1(人血液白血病細胞)
THP-1(人髓系白血病單核細胞)
TM3(小鼠睪丸間質(zhì)細胞)
TSCCa(人舌鱗癌細胞)
U-2 OS(人骨肉瘤細胞)
U251(人膠質(zhì)瘤細胞)
U-87 MG(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞)
U-937(人組織細胞淋巴瘤細胞)
V79(倉鼠肺細胞)
VCaP(人前列腺癌細胞)
Vero(非洲綠猴腎細胞)
WI-38(人胚肺細胞)
WISH(人羊膜細胞)
Y1(Y-1) (小鼠腎上腺皮質(zhì)細胞)
YAC-1(小鼠淋巴瘤細胞)
ZR-75-1(人乳腺癌細胞)
ZR-75-30(人乳腺癌細胞)